Pwodiksyon jeni jenetik ensilin

Ensilin - yon òmòn pankreyas ki kontwole | idrat kabòn metabolis ak kenbe yon nivo nòmal nan cazdpanan san an. Yon mank de sa a òmòn nan kò yo kondwi.) Nan youn nan maladi ki pi grav - dyabèt, ki, kòm kòz lanmò a, se nan twazyèm plas apre maladi kadyovaskilè ak kansè. Ensilin se yon ti globule | pwoteyin ki gen 51 résidus asid amine epi ki gen de chenn polipeptid ki lye ansanm pa de pon disulfid. Li se sentetiz nan fòm lan nan yon sèl-chèn fekèt précurseur, preproinsulin, ki gen koi yon siyal santral peptides (23 résidus asid amine) ak yon 35-lyen konekte peptides (C-peptides). Lè yo retire peptides nan siyal, proinsulin soti nan 86 résidus asid amine ki te fòme nan selil la, nan ki chenn A ak B nan ensilin yo konekte.C-neiyon twid, ki bay yo ak oryantasyon ki nesesè a $ 3 sou disulfid la. Apre detachman pwoteyolitik nan peptides C a, ensilin fòme.

Yo konnen plizyè fòm dyabèt. Fòm ki pi grav, pou tretman ki pasyan an bezwen ensilin (yon fòm ensilin ki depann de maladi a), se koze pa lanmò selektif selil ki sentèz òmòn sa a (selil nan ilo de Langerhans nan pankreyas la). Yon fòm dyabèt melit, pou ki tretman ak ensilin pa obligatwa, se pi komen, li ka jere avèk èd nan rejim apwopriye ak re:> ma. Tipikman, pankreyas la nan bèf ak bèf se pa sa yo itilize nan endistri a vyann ak Canning ak se mete yo nan kabwèt frijidè pou konpayi pharmaceutique kote se ekstraksyon òmòn te pote soti. Pou jwenn 100 g! Talan ensilin mande pou 800-1000 kg de matières

Te sentèz la nan tou de chenn ak koneksyon nan disudfid bon yo jwenn ensilin nan 1963 ak 1965. twa ekip rechèch nan USA a, Lachin ak Almay. Nan lane 1980, konpayi an Danwa Novo Industri devlope yon metòd pou konvèti ensilin kochon ensilin imen pa ranplase rezidi a 30 nan alanin nan chèn B ak yon rezidi threonine. Tou de ensilin pa t 'diferan nan aktivite ak dire nan aksyon.

Travay sou jeni jenetik ensilin te kòmanse apeprè 20 ane de sa. Nan lane 1978, yon mesaj parèt sou pwodiksyon an nan yon souch nan Escherichia coli pwodwi proinsulin rat (USA). Nan menm ane an, yo te sentetize chak grenn chenn ensilin moun pa ekspresyon jèn sentetik yo nan selil yo.E.coli(Fig. 5.11). Chak nan jèn sentetik ke yo te jwenn yo te branche sou 3'-fen nan jèn anzim (3-galaktosidaz e yo te rantre nan plasmid vektè a(pBR322).Selil yoE.colitransfòme ak plasmid sa yo recombinant, ibrid (chimeric) pwoteyin yo te pwodwi ki fòme ak yon fragman nan p-galaktozidaz ak A oswa B ensilin peptide tache ak li atravè yon rezidi methionine. Lè wap trete yon pwoteyin chimik ak bromid cyanogen, peptide a lage. Sepandan, fèmen pon disulfure ant chenn ensilin ki te fòme yo te difisil.

Nan lane 1981, yon analogik pro-ensilin, mini-C-pro-ensilin, te sentetiz nan ki 35-inite C-peptide a te ranplase pa yon segman nan sis asid amine: arg-arg-gly-ser-lys-arg ak ekspresyon li yo te montre nan ...E.coli.

Nan lane 1980, W. Gilbert ak kòlèg li yo izole mRNA ensilin nan yon rat pankreyas P-selil timè ak jwenn cDNA nan men l 'lè l sèvi avèk transcriptase ranvèse. Te kadna a ki kapab lakòz mete nan plasmid lapBR322E.colinan mitan pati nan jèn penisilinaz la. Plasma recombinant la genyen enfòmasyon sou estrikti proinsulin lan.Kòm yon rezilta nan tradiksyon mRNA, yo te fè yon pwoteyin ibrid sentetiz nan selil ki gen penisilinaz ak sekans proinsulin, ki te dijere ak trypsin soti nan tankou yon pwoteyin.

An 1978, anplwaye nan Enstiti a nan Bioorganic Chimi anba sipèvizyon Acad. Yu. A. Ovchinnikov, de estriktirèl jèn kodaj sentèz neuropeptid yo te sentetiz:leucine-enkephalin ak bradykinin.Jenèz sentin de lefèn enkepalin lan te gen de "kolan" fini:

Te jèn nan sentetik ki kapab lakòz ansanm ansanm ak yon fragman ADN natirèl ki gen pwomotè a ak pati nan pi pre nan E. coli jèn pwoteyin P-galaktosidaz la.E.colinan plasmid la

Jwenn ensilin, metòd jenetik jenetik, biyoteknoloji - kou

1. Estrikti a ak fonksyon ensilin 5

1.1. Estrikti molekil ensilin 5

1.2. Siyifikasyon byolojik ensilin 7

1.3. Ensilin Biosynthesis 8

2. Jenetik jenetik sentèz ensilin 10

2.1. Itilizasyon metòd jeni jenetik pou sentèz dwòg 10

2.2. Metòd jeni jenetik 11

2.3. Pwodiksyon jeni jenetik ensilin 14

Ekstrè nan tèks la

Anplis, tou de eleman sa yo ka prezan ansanm nan konpozisyon pwoteyin ibrid la. Anplis de sa, lè kreye pwoteyin ibrid, ka prensip la nan pluridimensionalite dwe itilize - prezans nan plizyè kopi polipeptid la sib nan pwoteyin la ibrid, ki ka ogmante siyifikativman sede a nan pwodwi a sib.

Nan UK a, tou de seksyon ensilin imen te sentetize lè l sèvi avèk E. coli, ki konekte nan yon molekil nan òmòn biyolojik aktif. Nan lòd pou yon òganis iniselilè sentèz molekil ensilin sou ribozom li yo, li nesesè bay li ak pwogram ki nesesè yo, se sa ki, entwodwi jèn nan òmòn nan li.

Te recombinant ensilin jwenn nan Enstiti a nan Akademi Ris la Syans lè l sèvi avèk jenetikman enjenyè tansyon nan E. coli. Se yon pwoteyin précurseur ibrid ki eksprime nan men Biomass a grandi, ki eksprime an kantite

40. nan pwoteyin total selilè ki gen preproinsulin.

Se konvèsyon li nan ensilin in vitro te pote soti nan sekans nan menm jan an nan vivo - se polipeptid a ki mennen ale kole, preproinsulin se konvèti nan ensilin nan premye etap yo nan saturit oksidatif, ki te swiv pa fèmen redukteur nan twa disulfure ak izolasyon anzimatik nan obligatwa C-peptide la. Apre yon seri de purifikasyon ion-, jèl ak purifikasyon HPLC, se ensilin imen ki gen gwo pite ak aktivite natirèl.

Pou jwenn ensilin, se yon souch itilize ak yon sekans nikleyotid eleman nan plasmid a eksprime yon pwoteyin ibrid ki gen ladan yon pwinsulin lineyè ak yon fragman nan Staphylococcus aureus pwoteyin A tache ak N-tèminal li yo nan yon rezidu methionine 8, 9, 10.

Kiltivasyon nan Biomass satire nan selil nan recombinant souch la bay nan konmansman an nan pwodiksyon an nan yon pwoteyin ibrid, izolasyon an ak transfòmasyon sekans nan ki nan tib mennen nan ensilin.

Yon lòt fason posib tou: jwenn nan sistèm bakteri a nan ekspresyon yon pwoteyin recombinant ki fòme nan imen proinsulin ak polyhistidine ke tache ak li atravè rezidu methionine. Li se izole lè l sèvi avèk kromatografi quelat sou kolòn ak Ni-agarose ak bryan klivaj.

Pwoteyin izole a se S-sulfonated. Transfòmasyon ak mas spectrometric analiz de jwenn proinsulin an fè purifikasyon pa kromatografi echanj ion sou anyon echanj résine ak RP (faz ranvèse) segondè pèfòmans kromatografi likid montre prezans nan pon disulfure ki koresponn ak pon yo disulfure nan natif natal proinsulin moun.

Dènyèman, yo te fèmen atansyon senplifye pwosedi a pou pwodwi ensilin recombinant pa jeni jenetik.Se konsa, pou egzanp, ou ka jwenn yon pwoteyin ki gen proinsulin tache ak N-tèminal la nan rezidi nan lizin nan peptides nan lidè interleukin.

2. Pwoteyin la eksprime ak lokalize nan kò enklizyon. Aprè izolasyon, pwoteyin ki pwodui ensilin ak C-peptid te fann avèk trypsin 5, 8, 10.

Yo ensilin ki kapab lakòz a ak C-peptides pirifye pa RP-HPLC. Trè siyifikatif lè kreye estrikti kole se rapò a nan mas yo nan konpayi asirans la pwoteyin ak polipeptid la sib.

C-peptides avèk èd nan amateur asid amine ki gen sit restriksyon Sfi I ak de rezin arginine nan kòmansman an ak nan fen espasy la pou pita pwoteyin trypsin dijesyon yo ki konekte dapre prensip la tèt-ke.

HPLC nan pwodwi yo klivaj montre ke klivaj la nan C-peptide la montan kantitativman, e sa pèmèt itilizasyon multimeric jèn sentetik jwenn polipeptid sib sou yon echèl endistriyèl.

Konklizyon

Radikal, ak nan pifò ka yo, sèl fason pou kenbe kapasite lavi ak travay pasyan ki gen dyabèt melit yo se nan dat, ensilin.

Anvan yo te resevwa ak entwodwi ensilin nan pratik klinik, youn a de ane soti nan aparisyon nan maladi a nan kalite I pasyan dyabèt te espere mouri, malgre itilize nan rejim yo ki pi feblès.

Pasyan dyabèt tip I bezwen terapi ranplasman tout lavi ak preparasyon ensilin. Sispansyon an nan administrasyon regilye nan ensilin pou yon rezon ki fè oswa yon lòt mennen nan devlopman rapid nan konplikasyon ak lanmò rapid nan pasyan an.

Kounye a, prévalence de dyabèt se nan twazyèm plas la apre maladi nan sistèm la kadyovaskilè ak timè malfezan. Prevalans nan dyabèt nan mitan granmoun yo, dapre ,ganizasyon Mondyal Lasante, nan pi fò rejyon nan mond lan se 2-5% epi gen tandans ogmante chak.

1. ane nan kantite pasyan prèske double. Nimewo a nan pasyan ensilin-depann, malgre pwogrè la evidan nan jaden an nan swen sante, ap ogmante chak ane, ak kounye a nan Larisi pou kont li se sou 2 milyon moun.

Metòd ki pi prometteurs pou pwodwi ensilin se metòd jeni jenetik. Se ensilin jenetikman Enjenyè jwenn nan separeman pwodwi chenn A ak B lè l sèvi avèk diferan tansyon pwodiktè ak plisman ki vin apre nan molekil la, ki te swiv pa separasyon isoforms, ak sentèz nan proinsulin nan E. Coli selil ak klivaj li yo ak trypsin ak carboxypeptidase ak pwodiksyon an nan insulin natif natal.

Devlopman nan preparasyon domestik ensilin jenetikman moun ensilin ouvri nouvo posiblite pou rezoud anpil pwoblèm nan dyabetoloji Ris yo nan lòd pou konsève pou lavi yo nan dè milyon de moun ki gen dyabèt.

Literati

Balabolkin M.I., Klebanova E.M., Kreminskaya V.M. Dyabèt sikilasyon: aspè modèn nan dyagnostik ak tretman / Doktè, ed. G.L. Vyshkovsky.-2005.- M.: RLS-2005, 2004.- 960 p.

Gavrikov, A.V. Optimizasyon pwodiksyon bioteknolojik nan sibstans ki sou interferonòm recombinant imen: dis. ... cand. biol. Syans - M, 2003

Ensilin jenetikman moun imen. Ogmante efikasite nan separasyon kromatografi lè l sèvi avèk prensip la nan bifunctionality. / Romanchikov A.B., Yakimov S.A., Klyushnichenko V.E., Arutunyan A.M., Wulfson A.N. // Bioorganic Chimi, 1997 - 23, No. 2

Glick B., Parsnip J. Kontwòl pou itilize metòd biyoteknoloji // B. Glick, J. Parsnip / Molekilè Biyoteknoloji = Molekilè Biyoteknoloji. - M .: Mir, 2002 .-- S. 517-532. - 589 p.

Glick B., Pasternak J. Molekilè Biotechnology. Prensip ak aplikasyon. M.: Mir, 2002.

Davis R., Botstein D, Roth J. Metòd jeni jenetik. Jenetik bakteri // R. Davis, D. Botstein, J. Roth / Per. soti nan angle.-M .: Mir. - 1984.- 176 p.

Ermishin A.P.Jenetikman modifye sganis: Mit ak Reyalite / A.P. Ermishin // Mn.: Tehnalogaliya.- 2004. - 118 p.

Fondamantal nan famasetik biyoteknoloji: Liv manuèl / TP Prischep, V.S. Chuchalin, K.L. Zaykov, L.K. Mikhaleva. - Rostov-on-Don.: Phoenix, Tomsk: NTL Publishing House, 2006.

Patrushev L.I. Sistèm jenetik atifisyèl. // L.I Patrushev / M: Nauka.- 2004.

Romanchikov, A.B. Ensilin jenetikman moun imen. Ogmante efikasite nan separasyon kromatografi lè l sèvi avèk prensip la nan bifunctionality. / A.B. Romanchikov ak lòt moun.

// Bioorganic Chimi. 1997. Non 2. p. 23

Rybchin V.N. Fondamantal nan Jeni jenetik // V.N. Rybchin / 2nd ed., Revize. epi ajoute.: Liv pou inivèsite yo. SPb.: Piblikasyon kay SPbSTU. - 2002 .-- 522 s.

Schelkunov S. N. Jeni jenetik // Schelkunov S. N. / Novosibirsk: Sib. univ. Piblikasyon House. 2008.

Schelkunov, S.N. Jeni jenetik: liv. alokasyon pou. - 2nd, ed., Rev. epi ajoute. - Novosibirsk: Sib. univ. Piblikasyon House, 2004 .-- 496 p.

1. Kote lyann disulfid yo nan molekil ensilin lan.

2. Aranjman rès asid amine nan molekil ensilin lan

Efè ensilin sou anzim metabolik kle yo

Fib nan misk tisi grese Aktivasyon 1. Fosfodiesteraz 1. Fosfodiesteraz 1. LP-lipaz

4. Piruvat dezidrogenaz konplèks

4. Piruvat dezidrogenaz konplèks

5. Phosphatase glycogène sintase ak glikojèn fosforilase

5. glycogen synthase phosphatase b. Endilasyon acetil-CoA-carboxylase 1. Glukokinaz 1. Glyceraldehyde fosfat dezidrogenaz

6. Represyon glikoz-6-fosfat dezidrogenaz phosphoenolpyruvate carboxykinase

Fig. 3 Scheme nan ensilin biosynthesis nan β-selil nan ilo nan Langerhans. ER - endoplasmic reticulum. 1 - fòmasyon yon peptides siyal, 2 - sentèz nan preproinsulin, 3 - klivaj nan siyal la peptides, 4 - transpò nan proinsulin nan aparèy la Golgi, 5 - konvèsyon nan pwinsulin nan ensilin ak C-peptide ak enklizyon ensilin ak C-peptides nan granules sekresyon, 6 - ensilin sekresyon ak C peptides.

4. Jeneral konplo pou sentèz ensilin nan men chèf anvan li yo

Fig. 5 sentèz ensilin pa fòmasyon de chenn separe

Metòd pou jwenn jenetikman enjenyè imen

Envansyon an gen rapò ak jaden an nan biotechnologie, ak an patikilye nan pwodiksyon an nan jenetikman enjenyè ensilin moun pou fabrike nan dwòg yo itilize nan tretman dyabèt sikre.

Metòd la se te pote soti nan kilti yon souch pwodiktè nan yon pwoteyin ibrid ki gen imen proinsulin, Escherichia coli BL21 / pPINS07 (BL07) oswa Escherichia coli JM109 / pPINS07, deranje selil yo pa dezentegrasyon, separe enklizyon kò ki gen pwoteyin la ibrid.

Next, preliminè lave nan kò yo enklizyon, dissolisyon similtane nan pwoteyin lan ak restorasyon nan disulfure lyezon nan yon zòn de defans ak 5-10 mititotreitol mM ak 1 mM EDTA yo te pote soti, renaturasyon ak pirifye nan pwoteyin fizyon renatured pa kwaze kwasans ion.

Se klivaj la nan pwoteyin la ibrid pote soti nan idroliz a jwenti trypsin ak carboxypeptidase B nan yon rapò pwa nan pwoteyin la ibrid, trypsin ak carboxypeptidase B 4000: 0.6: 0.9.

Se pirifye ensilin la te pote soti nan idrofob kromatografi oswa faz ranvèse segondè pèfòmans kromatografi likid ki te swiv pa filtraj jèl, ak izolasyon nan ensilin pa kristalize nan prezans sèl zenk. Envansyon an pèmèt redwi pwosesis la nan jwenn jenetikman Enjenieri moun ensilin ak ogmante pwodiksyon li yo.

Envansyon an gen rapò ak jaden an nan biotechnologie, ak an patikilye nan pwodiksyon an nan jenetikman enjenyè ensilin moun pou fabrike nan dwòg yo itilize nan tretman dyabèt sikre.

Pran nan kont reyalizasyon prensipal yo nan dyabètoloji modèn ak rekòmandasyon yo nan ,ganizasyon Mondyal Lasante, peyi Ewopeyen an 2001 te konplete tranzisyon an nan itilize nan ensilin moun. Nan sans sa a, devlopman metòd pou pwodwi ensilin lè l sèvi avèk metòd yo nan teknoloji ADN recombinant se yon travay ijan.

Yon metòd li te ye pou pwodwi ensilin jenetikman moun ki te enjenyè, ki gen ladann nan kiltive yon pwodiksyon souch E. Coli pwodwi proinsulin, ki gen yon sekans nan de domèn IgG sentetik obligatwa nan pwoteyin staphylococcal A.

Metòd la konsiste nan detwi selil bakteri, pou jwenn enklizyon Taurus ki gen pwinsulin, dissolve enklizyon Taurus, sulfitoliz oksidatif nan proinsulin, renaturasyon li yo, pou pirifye nan pwoteyin renatured pa enfomasyon kwomatografi, klivaj nan Proinsulin ak anzim pwoteyolitik (trypsin ak carboxypeptidase B) ak purifikasyon final la nan efikasite segondè-saj fyèv kromatografi (Nilson J., Jonasson P., Samuelsson E., Stahl S., Uhlen M. "Entegrasyon pwodiksyon ensilin imen ak C-peptides li yo", Journal of biotechnology, 1996, v. 48, p. 241-250) .

Dezavantaj yo nan metòd sa a yo se gwo pwi de pwodwi a ak itilize a nan pwodiksyon an nan savon ensilin, ki ka prezan nan pwodwi a sib.

Yon metòd li te ye pou pwodwi ensilin jenetikman moun, ki gen ladann kilti selil pwodiktè souch E.

Coli DN5 a / pVK100, detwi selil bakteri pa dezentegrasyon ultrasons, kò enklizyon separe ki gen pwoteyin la ibrid ki soti nan dlo-enpurte pa santrifigasyon, fonn kò yo enklizyon nan yon zòn de defans ki gen 8 M ure, 1 mititotreitol MM, 0.1 M Tris-HCl, pH 8.0, pou 12-16 èdtan.

Ensolib enpurte yo retire nan santrifigasyon, apre yo fin ki se konsantrasyon an nan ditiotreitol ogmante a 10 mM ak disulfure obligasyon yo retabli nan 37 ° C pou 1 èdtan. Solisyon an te dilye 5 fwa ak dlo frèt, ajiste nan pH 4.5 ak enkubatè pou 2 èdtan nan 4 ° C yo fòme yon provoqués.

Te provoqués a ki gen pwoteyin la ibrid separe pa santrifigasyon ak renatured, byen vit fonn nan dlo frèt nan yon pH nan 10-12, apre yo fin ki li te dilye ak 10 mM glas ari, pH 10.8, ak kenbe nan 4 ° C lannwit lan. Apre ultrafiltration, solisyon an te sibi jèl filtraj sou yon kolòn Sephadex G-50 ak eluye ak 10 mM glikin tanpon.

Fraksyon ki gen pwoteyin fizyon yo kolekte, ultrafiltre, ak sèk friz. Pwoteyin nan fizyon ki kapab lakòz se fonn nan 0.08 M Tris-HCl tanpon, pH 7.5, nan yon konsantrasyon nan 10 mg / ml ak tache ansanm ak trypsin ak carboxypeptidase B (rapò nan carboxypeptidase B: trypsin: pwoteyin fizyon 0.3: 1: 10) nan 37 ° C pou 30 minit.

Lè sa a, ajoute izopropanol a 40%. Se melanj lan kwaze sou yon kolòn DEAE-Sephadex A-25 ak elue ak 0.05 M Tris-HCl tanpon, pH 7.5 ak 40% izopropanol ak yon gradyan lineyè nan klori sodyòm de 0 a 0.1 m. Apre yo retire izopropanol, konsantrasyon nan klori sodyòm ogmante a 25%, chanjman pH la 2.0 epi kolekte ensilin presipite.

(Chen J.-Q., Zhang H.-T., Hu M.-N., Tang J.-G., "Pwodiksyon ensilin imen nan yon sistèm E. Coli ak pwinsulin met-lys-human kòm eksprime a. precursor "Applied Biochemistry and Biotechnology, 1995, v. 55, p. 5-15).

Dezavantaj yo nan metòd sa a gen ladan itilize nan filtraj jèl nan premye etap yo, ki mande pou kantite siyifikatif nan sorban ak yon gwo kantite anzim yo itilize nan klivaj la nan pwoteyin la ibrid.

Yon metòd li te ye pou pwodwi ensilin jenetikman moun ki enjenyè, comprenant kiltive yon souch pwodiktè nan Escherichia coli JM109 / pPINS07, detwi selil bakteri pa dezentegrasyon, separe enklizyon kò ki gen yon pwoteyin ibrid, dissolve yo nan yon zòn de defans ki gen ure ak dithiothreitol, renaturasyon ak pirifye nan pwoteyin an ibridize renatured. presipitasyon konpoze malpwòpte nan izopwopanòl 40% ki te swiv pa kromatografi sou Sepharose KM, sekans sekans li yo ak trypsin ak carboxypeptidase B, pandan y ap pwodwi yo. trypsinolysis se cromatographed sou SP-Sepharose, ekilibre ak 0.03-0.1 M amonyòm acetate pH 5.0-6.0 ki gen 6 M ure, ak elution pwoteyin ak yon gradyan lineyè nan klori sodyòm soti nan 0 a 0.5 M nan kòmanse a tanpon, ak fraksyon ensilin ke yo te jwenn apre klivaj ak karbokseptinase B te fè sèvis pou mete pa revokasyon kwazyè segondè pèfòmans likid pèfòmans (RP HPLC) ki te swiv pa filtraj jèl (Pat. RF No 2141531, MKI C12P 21/02, publ. 1999)

Dezavantaj yo nan metòd la gen ladan itilize nan kantite siyifikatif nan ure ak Solvang òganik nan etap nan pou pirifye pwoteyin la ibrid.

Dyabèt ekspè

Anvan yo itilize ensilin, esperans lavi yon pasyan ki gen dyabèt melit te pa plis pase 10 ane. Envansyon nan dwòg sa a te sove dè milyon de pasyan yo. Imen jeni jenetik ensilin se avansman nan dènye nan syans.

Rezilta a nan anpil ane nan travay di

Anvan yo te envansyon nan jeni jenetik (recombinant) preparasyon an, ensilin te izole nan pankreyas la nan bèt ak kochon.

Diferans ki genyen ant ensilin nan pork ak moun se sèlman yon sèl asid amine

Dezavantaj yo nan metòd sa a pou jwenn dwòg la:

• konpleksite nan depo ak transpò nan materyèl byolojik kri,
• mank bèt
• difikilte ki asosye avèk alokasyon an ak pou pirifye òmòn pankreyas,
• gwo risk reyaksyon alèjik.

Avèk sentèz ensilin imen natirèl nan byoreactor an 1982, yon nouvo epòk byotèknolojik te kòmanse. Si nan dimanch maten byen bonè nan terapi ensilin, objektif la nan syantis yo te sèlman siviv nan pasyan an, nan tan nou an se devlopman nan dwòg nouvo ki vize a akonplisman konpansasyon dirab pou maladi a. Objektif prensipal rechèch syantifik la se amelyore kalite lavi yon pasyan ki gen dyabèt.

Teknoloji modèn

Kalite dwòg, selon metòd preparasyon an:

Kisa k ap pase nan kò a apre administrasyon dwòg?

Konekte ak reseptè manbràn selilè a, ensilin fòme yon konplèks ki aplike pwosesis sa yo:

1. Amelyore entelijan transpò glikoz ak fasilite absòpsyon li yo.
2. Ankouraje liberasyon an nan anzim ki ap patisipe nan pwosesis la nan glikoz.
3. Redwi pousantaj fòmasyon glikojèn nan fwa a.
4. Estimile grès ak pwoteyin metabolis.

Nan ka administrasyon lar, ensilin kòmanse aji nan 20-25 minit. Dire a nan dwòg la soti nan 5 a 8 èdtan. Li se pli lwen sere pa ensilaz la anzim ak elimine nan pipi a. Medikaman an pa travèse plasennta a epi li pa pase nan lèt tete.

Lè preskri ensilin jenetikman preskri?

Si ou bezwen èd ijan

Se ensilin jenetikman moun Enjenyeu yo itilize nan ka sa yo:

1. Kalite 1 oswa tip 2 dyabèt. Yo itilize li kòm yon tretman endepandan oswa nan konbinezon ak lòt dwòg.
2. Avèk rezistans nan ajan hypoglycemic oral.
3. Avèk dyabèt nan fanm ansent.
4. Nan ka konplikasyon soti nan ren yo ak fwa.
5. Lè oblije chanje ensilin pwolonje.
6. Nan peryòd la preoperatwar.
7. Nan ka kondisyon lavi ki menase (koma hyperosmolar oswa ketoacidotic).
8. Nan sitiyasyon ijans (anvan akouchman, ak blesi).
9. Si gen blesi po distròfik (ilsè, furunculosis).
10. Tretman pou dyabèt sou background nan nan enfeksyon.

Imen jeni jenetik ensilin se byen tolere epi yo pa lakòz reyaksyon alèjik, kòm li se konplètman idantik ak òmòn natirèl la.

Siveyans konstan enpòtan!

Li entèdi preskri medikaman nan ka ta gen:

• bese sik nan san
• ipèrsansibilite a dwòg la.

Nan premye jou yo apre randevou a nan dwòg la, siveyans atansyon nan pasyan an se nesesè.

Efè segondè yo

Urtikèr Danje! Èd Quincke a!

Nan ka ki ra, lè w ap itilize ensilin, konplikasyon sa yo posib:

• reyaksyon alèjik (urtikèr, èdèm Quincke, gratèl nan po a),
• yon diminisyon byen file nan sik nan san (devlope akòz rejè nan dwòg la pa kò a oswa nan evènman an nan yon konfli iminitè),
• pwoblèm konsyans
• nan ka grav, devlopman koma ipoglikemik posib,
• swaf, bouch sèk, letaji, apeti,
• ipèglisemi (lè w ap itilize dwòg la kont yon background nan enfeksyon oswa lafyèv),
• wouj feminen
• reyaksyon lokal nan zòn administrasyon an (boule, demanjezon, atrofye oswa pwopwosyon grès lar).

Pafwa adaptasyon a dwòg la akonpaye pa maladi tankou enflamasyon ak defisyans vizyèl. Manifestasyon sa yo anjeneral disparèt apre kèk semèn.

Ki jan yo jwenn jenetikman Enjenyè ensilin nan yon famasi?

Medikaman an disponib nan fòm yon solisyon pou administrasyon parenteral:

Li pa difisil yo chwazi yon preparasyon ensilin pran an kont karakteristik endividyèl yo nan pasyan an.

Regleman pou itilize

Pi souvan, yo itilize lar sou ensilin.

Nan ka ijan, yo bay dwòg la venn.

Nan kondisyon grav nan pasyan an

Menm yon dyabetik ki gen eksperyans ka fè yon erè lè w ap itilize dwòg la.

Yo nan lòd pou fè pou evite konplikasyon, li nesesè:

1. Anvan w itilize, tcheke dat ekspirasyon medikaman an.
2. Obsève rekòmandasyon depo yo: Ou ta dwe mete bokal siplemantè nan frijidè a. Ti bwat la devlope kapab estoke nan tanperati chanm nan yon kote ki fè nwa.
3. Asire w ke ou sonje dòz ki kòrèk la: li preskripsyon doktè a ankò.
4. Anvan piki a, li enperatif pou lage lè ki soti nan sereng lan.
5. Po a ta dwe pwòp, men li se endezirab yo sèvi ak alkòl pou pwosesis, depi li diminye efikasite nan dwòg la.
6. Chwazi kote ki pi bon pou piki. Lè yo prezante anba po a nan vant la, dwòg la ap aji pi vit. Pi dousman absòpsyon nan ensilin lè yo te entwodui nan pliye a fesye oswa zepòl.
7. Sèvi ak zòn nan tout sifas (prevansyon nan konplikasyon lokal). Distans ki genyen ant piki yo ta dwe omwen 2 cm.
8. Kenbe po a nan pli a diminye risk pou trape nan misk la.
9. Enjekte sereng lan anba po a nan yon ang pou medikaman an pa genyen fuit.
10. Lè yo bay piki nan vant lan, yo bay ti ensilin ensilin 20 minit anvan yon repa. Nan ka yon chwa nan yon zepòl oswa bounda - trant minit anvan yon repa.

Konbinezon ak lòt dwòg

Souvan ak dyabèt, pasyan an pran plizyè medikaman. Konbinezon an ak lòt dwòg kapab afekte efè ki ka geri nan ensilin jenetikman Enjenyè.

Pou anpeche konplikasyon, ou bezwen konnen:

Surdozaj

Nan kèk ka, administrasyon ensilin mennen nan yon diminisyon toudenkou nan sik nan san. Pwoblèm lan souvan rive akòz move dòz seleksyon an.

Premye sentòm ipoglisemi:

• feblès
• palè nan po an
• eta enkyetid
• vètij
• dezoryantasyon
• pèt sansasyon nan bra, janm, lang ak bouch,
• tranble pouw mache
• swe frèt
• yon santiman fò nan grangou
• tèt fè mal.

Tranbleman; toudenkou deteryorasyon nan byennèt

Si ou remake sentòm sa yo nan tèt ou, ou bezwen manje byen vit yon bagay ki gen idrat kabòn fasil dijèstibl. Li kapab bonbon, sirèt, yon moso sik oswa pen blan. Dous te ede nan sitiyasyon sa yo.

Si kondisyon an vin pi grav, ou dwe rele yon anbilans. Ipoglisemi ka lakòz yon koma oswa lanmò pasyan an.

Èske recombinant ensilin danjere?

Bonjou Recombinant ensilin pa diferan de natirèl. Pou jwenn li, bakteri jenetikman modifye yo te itilize.

Sèvi ak teknoloji jeni jenetik, se yon ADN recombinant ki gen jèn nan ensilin anjandre nan selil la nan E. coli. Sganis jenetikman modifye miltipliye ak pwodwi yon òmòn. Dwòg la se trè efikas e li gen yon wo degre de pirifye.

Ensilin Pati II. Pwodiksyon ensilasyon mikrobyolojik

eleman vokasyon - siyifikativman fasilite izolasyon pwoteyin ibrid la.

Anplis, tou de sa yo konpozan ka ansanm prezan nan konpozisyon an nan pwoteyin la ibrid.

Anplis de sa, lè kreye pwoteyin ibrid, ka prensip la nan pluridimensionalite dwe itilize (ki se, plizyè kopi polipeptid la sib yo prezan nan pwoteyin la ibrid), ki ka ogmante siyifikativman sede a nan pwodwi a sib.

2 Ekspresyon de nan ensilin selil E. coli ..

Nan travay la, otè yo te itilize souch JM 109 N1864 ak yon sekans nikleyotid eleman nan plasmid a eksprime pwoteyin la ibrid, ki gen ladann proinsulin lineyè ak Staphylococcus aureus fragman pwoteyin A tache ak N-tèminal li nan rezidi a methionine.

Kiltivasyon nan Biomass satire nan selil nan recombinant souch la bay nan konmansman an nan pwodiksyon an nan yon pwoteyin ibrid, izolasyon an ak transfòmasyon sekans nan ki nan tib mennen nan ensilin.

Yon lòt gwoup chèchè te resevwa yon pwoteyin recombinant nan sistèm ekspresyon bakteri a nan yon fizyon ki gen pwodyi imen ak yon ke polyhistidine atache a li nan yon rezidu methionine. Li te izole lè l sèvi avèk kromatografi quelat sou kolòn Ni-agaroz ki soti nan kò enklizyon ak dijere ak bromid syanojèn.

Transfòmasyon ak analiz mas spectrométrique de proinsulin te jwenn pirifye pa kromatografi echanj ion sou résine echanj anyon ak RP (faz ranvèse) HPLC (kromatografi likid pèfòmans segondè) te montre prezans pon disulfure ki koresponn ak pon disulfure nan proinsulin natif natal moun. Papye a rapòte sou devlopman yon nouvo, amelyore metòd pou pwodwi ensilin imen pa jeni jenetik nan selil pwokaryotik. Otè yo te jwenn ke ensilin ki kapab lakòz nan estrikti li yo ak aktivite byolojik ki idantik ak òmòn nan izole nan pankreya yo.

Dènyèman, yo te fèmen atansyon senplifye pwosedi a pou pwodwi ensilin recombinant pa jeni jenetik. Se konsa, otè yo jwenn yon pwoteyin fizyon ki gen ladan lidè a peptides nan interleukin 2 tache ak N-tèminal la nan proinsulin nan rezidi lizin.

Pwoteyin lan te eksprime avèk efikasite epi lokalize nan kò enklizyon. Apre izolasyon, pwoteyin lan te dijere pwoteyin lan pou pwodwi ensilin ak C-peptides. Yon lòt gwoup chèchè te aji menm jan an.

Yon pwoteyin fizyon ki gen proinsulin ak de domèn sentetik nan staphylococcus Yon pwoteyin obligatwa IgG te lokalize nan kò enklizyon, men te gen yon nivo ki pi wo nan ekspresyon. Pwoteyin lan te izole pa enfomasyon kwomatografi lè l sèvi avèk IgG ak trete ak trypsin ak carboxypeptidase B.

Yo te ensilin la ki kapab lakòz ak C-peptides pirifye pa RP HPLC. Lè y ap kreye estrikti kole, rapò mas la nan pwoteyin konpayi asirans lan ak polipeptid la sib se trè siyifikatif.

Se konsa, travay la dekri konstriksyon an nan estrikti fizyon, kote yo te yon pwoteyin obligatwa albumin imen imen itilize kòm yon polipeptid konpayi asirans lan. Youn, twa ak sèt C-peptides te tache ak li.

C-peptides te konekte sou yon baz tèt-ke lè l sèvi avèk bag asid amine pote sit restriksyon Sfi I ak de rezin arginine nan kòmansman an ak nan fen distans la pou divizyon pwoteyin ki vin apre avèk trypsin. HPLC nan pwodwi yo klivaj te montre ke klivaj la nan C-peptides a se quantitative, ak sa a pèmèt itilize nan multimeric jèn sentetik jwenn polipeptid sib sou yon echèl endistriyèl.

Travay la dekri preparasyon an nan mutan la nan, ki gen ranplasman nan Arg32Tyr. Lè yo te pwoteyin sa a ko-taye ak trypsin ak carboxypeptidase B, yo te natif natal ensilin ak yon C-peptide ki gen rezidi a tirozin ki te fòme. Lèt la, apre etikèt 125I, se aktivman yo itilize nan radioimmunoassay. 3 Pou pirifye ensilin.

Ensilin ki fèt pou fabrike dwòg yo dwe gen pite segondè. Se poutèt sa, yon kontwòl trè efikas nan pite a nan pwodwi yo jwenn nan chak etap nan pwodiksyon ki nesesè. Précédemment, RP ak IO (echanj iyon) te itilize HPLC karakterize proinsulin-S-sulfonate, proinsulin, endividyèl A- ak B-chenn, ak S-sulfonates yo.

Yon atansyon patikilye yo peye tou nan derive nan ensilin fliyoresan. Nan travay la, otè yo envestige aplikabilite a ak enfatifikasyon nan metòd kwomatografik nan analiz la nan pwodwi nan tout etap nan pwodiksyon imen ensilin ak trase yon orè nan operasyon kromatografi efektivman separe ak karakterize pwodwi yo ki kapab lakòz.

Anplis de sa, apwòch yo ap devlope otomatize ak akselere pwosesis yo pou detèmine pite a ak kantite ensilin.

Papye a rapòte sou etid sou posibilite pou yo sèvi ak RP kromatografi likid ak deteksyon elèktrochimik pou detèminasyon an nan ensilin, ak yon metodoloji pou detèminasyon an nan ensilin izole soti nan lanjan nan Langerhans pa kwomatografi imunoafeite ak deteksyon spectrometric te devlope.

Nan travay la, yo te envestige posiblite pou lè l sèvi avèk mikrodeterminasyon rapid ensilin lè l sèvi avèk kapilè elektwoforèz ak lazè deteksyon fluoresans. Analiz la fèt pa ajoute nan echantiyon an yon kantite lajan li te ye nan ensilin ki make ak phenylisothiocyanate (FITC) ak yon fragman Fab nan monoclonal antikò ensilin. Etikèt regilye ak regilye konpetitif reyaji ak konplèks la Fab. Yo ensilin FITZ ki make ak konplèks li yo ak Fab separe nan 30 segonn.

Dènyèman, yon gwo kantite te konsakre nan amelyorasyon nan metòd pou pwodwi ensilin, osi byen ke kreyasyon fòm dòz ki baze sou li.

Pou egzanp, nan Etazini yo, epatospèksyèl analik ensilin yo patante, ki struktural diferan de òmòn natirèl la akòz entwodiksyon de résidus diferan asid amine nan pozisyon 13-15 ak 19 nan chèn Yon ak nan pozisyon 16 nan chèn B.

Analòg yo jwenn yo te itilize kòm yon pati nan divès kalite parenteral (nan venn, nan misk, subcutan), fòm dòz entranazal oswa enplantasyon nan fòm lan nan kapsil espesyal nan tretman dyabèt sikre. An patikilye enpòtans se kreyasyon an nan fòm dòz administre san yo pa piki.

Papye a rapòte sou kreyasyon yon sistèm makromolekilè pou administrasyon oral, ki se ensilin imobilize nan volim yon hydrogel polymère modifye ak inhibiteurs proteolytic anzim. Efikasite nan tankou yon dwòg se 70-80% nan efikasite nan subcutanean prezante natif natal ensilin.

Nan yon lòt travay, se yon dwòg jwenn pa yon enkubasyon yon sèl-etap nan ensilin ak globil wouj nan san, pran nan yon rapò nan 1-4: 100, nan prezans yon ajan obligatwa.Otè yo rapòte resi yon medikaman ak yon aktivite nan 1000 inite / g, plen prezèvasyon nan aktivite apre yo fin administrasyon oral ak depo pou plizyè ane nan yon fòm likratize.

Anplis de kreye nouvo dwòg ak fòm dòz ki baze sou ensilin, nouvo apwòch yo ap devlope yo rezoud pwoblèm nan nan dyabèt.

Se konsa, otè yo transfected GLUT2 pwoteyin transporter cDNA deja stabfected ak gwo dimansyon ensilin cDNA nan HEP ​​G2 ins selil yo.

Nan jwenn klon HEP ​​G2 Insgl, glikoz stimul fèmen nan sekresyon ensilin nòmal ak potentiates repons la sekresyon a lòt estimilan sekresyon.

Mikroskopi imunoelektrik te revele granil ki gen ensilin ki gen yon fòm morfolojik ki sanble ak granules nan selil b nan ilo Langerhans yo. Posibilite pou itilize "atifisyèl b-selil" jwenn nan jeni jenetik pou tretman dyabèt sikre kalite 1 se kounye a anba diskisyon grav.

Ansanm ak rezoud pwoblèm pratik, mekanis yo nan aksyon nan ensilin, osi byen ke relasyon estriktirèl ak fonksyonèl nan molekil la, yo etidye. Youn nan metòd rechèch yo se kreyasyon dérivés divès kalite ensilin ak etidye fizikochimik yo ak pwopriyete iminolojik 23, 24.

Kòm mansyone pi wo a, yon nimewo nan metòd pou pwodiksyon an nan ensilin yo baze sou jwenn sa a òmòn nan fòm lan nan yon précurseur (proinsulin), ki te swiv pa klivaj anzimatik ensilin ak C-peptides. Koulye a, prezans nan aktivite byolojik yo te montre pou C-peptides a, ki fè li posib yo sèvi ak li pou rezon ki ka geri ansanm ak ensilin.

Nan atik sa yo nan seri sa a, pwopriyete yo fizikochimik ak byolojik nan C-peptides a, menm jan tou metòd pou preparasyon li yo, yo pral konsidere kòm.

Biyoteknoloji nan envantè de dwòg

Nan enterè yo se devlopman yo pou jwenn yon vèsyon 20K nan STGh. Yon travay pwomèt se jwenn ak etidye pa sèlman divès fòm STH, men tou immobilized STH yo nan lòd yo jwenn aksyon an pwolonje nan òmòn lan. Yon metòd orijinal te devlope pou jwenn imobilize STHch ak yon aksyon pwolonje.

Nan paralèl ak pwodiksyon an nan STH, yon orijinal entegre teknoloji pou pwodiksyon an nan adenoypophysis òmòn, ki gen ladan tout espès ki espesifik menm, ak kèk nan modifikasyon yo soti nan gst, te kreye. De gwo enpòtans se aplikasyon an nan yon pwogram ki vize yo kreye yon dwòg STH (somatogen) ki te jwenn nan jeni jenetik.

Gen eksperyans nan klinik montre ke, optimize tretman an ki wo kout, li se rekòmande gen nan asenal la plizyè preparasyon pharmaceutique menm jan jwenn nan teknoloji divès kalite oswa menm metòd (MF, Ausomatin, Somatogen).

Long-term tretman (pou ane) ak yon sèl preparasyon pou HSCH lakòz yon diminisyon nan sansiblite a nan li nan kò a.

An pati, sa ka rezilta nan fòmasyon antikò yo, men rezon prensipal la dwe chèche nan nivo reseptè yo ak pwosesis òmòn lan.

Travay ak GST, osi byen ke etid konplè nan sekrè òmòn ak divès kalite fòm yo fè li posib yo etidye sistèm yo ki te kreye pa nati ak pi byen konprann yo. Egzistans divès fòm natirèl STH nan kò a endike posibilite yo ak itilizasyon posib, pa egzanp, nan yon klinik.

Lè kreye nouvo preparasyon STHch, li nesesè premye nan tout konsantre sou fòm yo natif natal natirèl nan òmòn lan, epi, si sa apwopriye, a echèl yo pa jeni jenetik, kòm se fè ak monomè a STHch.

Nan pwodiksyon an nan preparasyon STHch soti nan gst, se yon complète teknoloji endistriyèl pou pwodiksyon an nan lòt òmòn nan adenoipophysis la (LGH, FSHch, TTGch ak lòt moun) avèk siksè aplike. Li nesesè pou pwodiksyon optimize pa entwodwi nouvo metòd avanse (kromatografi vokasyon, elatriye ...

), resevwa òmòn trè pi lè l sèvi avèk teknoloji entegre.

Li nesesè yo elaji pwodiksyon an epi sèvi ak nan kouche nan imunomikroanaliz nan òmòn yo nan adenohipofiz la pou dyagnostik ak biotechnologie, pote soti nan pwodiksyon an reglemante nan antikò estanda nan balans divès kalite, yo kreye nouvo preparasyon STHch, ki gen ladan moun imobil.

Lefèt ke STH afekte pwoteyin, grès, ak mineral metabolis, zak nan nivo selil la san yo pa yon ògàn sib, epi ki se yon anabolizan, bay kandida gwo pou sèvi ak li yo nan estimile pwosesis reparasyon ak trete divès maladi. Yon etid pi laj de pwoblèm sa yo, menm jan tou posibilite pou lè l sèvi avèk divès fòm modifye ak varyant nan STGch, se yon travay ijan ak pwomèt.

Jwenn ensilin nan biotechnologie

Ensilin, òmòn peptides nan ilo yo nan Langerhans nan pankreya a, se tretman prensipal la pou dyabèt. Se maladi sa a ki te koze pa mank ensilin epi li manifeste pa yon ogmantasyon nan glikoz nan san. Jiska dènyèman, ensilin te jwenn nan pankreyas la nan yon ti towo bèf ak yon kochon.

Medikaman an diferan de ensilin imen pa 1-3 ranplasman asid amine, se konsa ke te gen yon menas nan reyaksyon alèjik, espesyalman nan timoun yo. Itilizasyon ensilin terapetik la gaye toupatou te contrainte pa pri segondè li yo ak resous limite.

Pa modifikasyon chimik, ensilin nan bèt te fè konfonn soti nan imen, men sa vle di yon ogmantasyon adisyonèl nan pri nan pwodwi a.

Depi 1982, EliLilly te pwodwi ensilin jenetikman Enjenyè ki baze sou sentèz la separe nan E. coli A ak chenn B. Pri a nan pwodwi a diminye anpil, ensilin la ki kapab lakòz se ki idantik ak moun. Depi 1980, te gen rapò nan laprès la sou klonaj la nan jèn proinsulin, yon òmòn précurseur ki transfòme nan yon fòm ki gen matirite ak pwoteyoliz limite.

Teknoloji enkapsilasyon an aplike tou pou tretman dyabèt: selil pankreyas nan yon kapsil, ki te entwodwi yon fwa nan kò pasyan an, pwodwi ensilin pandan ane an.

Genetik entegre Integrated te lanse òmòn pileu-enteresan ak luteinizing. Peptides sa yo konpoze de de subunit. Sou ajanda a se sentèz endistriyèl oligopeptid òmòn nan sistèm nève a - enkephalins, bati soti nan 5 résidus asid amine, ak andorfin, analogue nan morfin.

Lè yo itilize rasyonèl, peptides sa yo soulaje doulè, kreye yon bon atitid, ogmante efikasite, konsantre atansyon, amelyore memwa, epi li mete yo nan lòd dòmi ak ve.

Yon egzanp sou aplikasyon an siksè nan metòd jeni jenetik se sentèz la nan p-andorfin lè l sèvi avèk teknoloji a pwoteyin ibrid ki dekri anwo a pou yon lòt òmòn peptides, somatostatin.

Metòd pou pwodwi ensilin moun:

Istorikman, premye fason pou jwenn ensilin pou rezon ki ka geri se izolasyon nan analogue nan òmòn sa a soti nan sous natirèl (ilo nan pankreyas la nan bèt ak kochon).

Nan 20s yo nan dènye syèk lan, li te jwenn ke ensilin bovin ak vyann kochon (ki pi pre ensilin imen an nan estrikti ak sekans amine asid) montre aktivite nan kò imen an ki konparab ak ensilin moun. Apre sa, te ti towo bèf oswa kochon ensilin itilize pou tretman pasyan ki gen kalite dyabèt mwen.

Sepandan, apre kèk tan li te montre ke nan kèk ka antikò nan bovin ak pork ensilin kòmanse akimile nan kò imen an, kidonk negation efè yo.

Nan lòt men an, youn nan avantaj ki genyen nan metòd sa a pou jwenn ensilin se disponiblite a nan matyè premyè (bovin ak vyann kochon ensilin ka fasil jwenn nan gwo kantite), ki te jwe yon wòl desizif nan devlopman nan premye metòd pou pwodwi ensilin moun.Metòd sa a yo rele semi-sentetik.

Nan metòd sa a pou pwodwi ensilin imen, ensilin kochon te itilize kòm yon matières. Octapeptid C-tèminal chèn B la te sere soti nan pirifye ensilin pork, apre yo te fè octapeptid C-tèminal imen ensilin sentetiz.

Lè sa a, li te chimikman tache, gwoup yo pwoteksyon yo te retire ak ensilin la ki kapab lakòz te fè sèvis pou mete. Lè yo teste metòd sa a pou jwenn ensilin, yo te idantite a konplè sou òmòn yo jwenn nan ensilin imen an.

Dezavantaj prensipal la nan metòd sa a se gwo pwi de ensilin a ki kapab lakòz (menm kounye a, sentèz la pwodui chimik octapeptid se yon plezi chè, espesyalman sou yon echèl endistriyèl).

Kounye a, se moun ensilin sitou jwenn nan de fason: pa modifikasyon nan ensèk ensèk pa porkin-metòd anzimatik ak pa metòd la jeni jenetik.

Nan premye ka a, se metòd la ki baze sou lefèt ke ensilin kochon diferan de ensilin imen nan yon sèl sibstitisyon nan C-tèminal nan chèn lan Ala30Thr B.

Se ranplasman nan alanin ak threonine te pote soti nan klivaj anzim-katalize nan alanin ak adisyon nan yon rezidi threonine pwoteje pa gwoup la carboxy olye pou yo li, ki se prezan nan yon gwo depase nan melanj lan reyaksyon. Apre klivaj nan gwoup pwoteksyon O-tert-butyl, ensilin imen an jwenn.

Ensilin lan te pwoteyin premye a te jwenn pou rezon komèsyal lè l sèvi avèk recombinant teknoloji ADN. Gen de apwòch prensipal pou pwodwi jenetikman Enjenyè moun ensilin.

Nan pwemye ka a, separe (diferan pwodiktè tansyon) yo jwenn pou tou de chenn ki te swiv pa plisman nan molekil la (fòmasyon nan disfure pon) ak separasyon izoform yo.

Nan dezyèm lan, pwodiksyon nan fòm lan nan yon précurseur (proinsulin) ki te swiv pa dijesyon anzimatik ak trypsin ak carboxypeptidase B a fòm aktif nan òmòn lan.

Kounye a, li pi preferab pou jwenn ensilin nan fòm yon précurseur, ki asire fèmen kòrèk la nan pon disulfure (nan ka a nan preparasyon apa nan chenn, sik siksesif nan denaturasyon, separasyon izoforms ak renaturasyon yo te pote soti).

Avèk tou de apwòch, li posib tou de endividyèlman jwenn eleman yo kòmanse (A- ak B-chenn oswa proinsulin), ak kòm yon pati nan pwoteyin ibrid. Anplis de chenn A ak B oswa proinsulin, pwoteyin ibrid yo ka gen ladan yo:

1) pwoteyin transpòtè - bay transpò a nan yon pwoteyin ibrid nan espas periplasmik nan yon selil oswa mwayen kilti,

2) eleman vokasyon - siyifikativman fasilite izolasyon nan pwoteyin la ibrid.

Anplis, tou de sa yo konpozan ka ansanm prezan nan konpozisyon an nan pwoteyin la ibrid. Anplis de sa, lè kreye pwoteyin ibrid, ka prensip la nan pluridimensionalite dwe itilize (ki se, plizyè kopi polipeptid la sib yo prezan nan pwoteyin la ibrid), ki ka ogmante siyifikativman sede a nan pwodwi a sib.

Ekspresyon deinil nan selil E. coli ..

Souch JM 109 N1864 ak yon sekans nikleyotid ki eksprime yon pwoteyin fizyon, ki gen ladann yon pwinsulin lineyè ak yon pwoteyin Staphylococcus aureus Yon fragman atache a N-tèminal li atravè rezidi methionine a, te itilize nan travay la.

Kiltivasyon nan Biomass satire nan selil nan recombinant souch la bay nan konmansman an nan pwodiksyon an nan yon pwoteyin ibrid, izolasyon an ak transfòmasyon sekans nan ki nan tib mennen nan ensilin.

Yon lòt gwoup chèchè te resevwa yon pwoteyin recombinant nan sistèm ekspresyon bakteri a nan yon fizyon ki gen pwodyi imen ak yon ke polyhistidine atache a li nan yon rezidu methionine. Li te izole lè l sèvi avèk kromatografi quelat sou kolòn Ni-agaroz ki soti nan kò enklizyon ak dijere ak bromid syanojèn.

Transfòmasyon ak analiz mas spectrométrique de proinsulin te jwenn pirifye pa kromatografi echanj ion sou résine echanj anyon ak RP (faz ranvèse) HPLC (kromatografi likid pèfòmans segondè) te montre prezans pon disulfure ki koresponn ak pon disulfure nan proinsulin natif natal moun. Li rapòte tou sou devlopman yon nouvo, amelyore metòd pou pwodwi ensilin imen pa jeni jenetik nan selil pwokaryotik. Otè yo te jwenn ke ensilin ki kapab lakòz nan estrikti li yo ak aktivite byolojik ki idantik ak òmòn nan izole nan pankreya yo.

Dènyèman, yo te fèmen atansyon senplifye pwosedi a pou pwodwi ensilin recombinant pa jeni jenetik. Se konsa, yo te jwenn yon pwoteyin fizyon ki fòme ak lidè a peptides nan interleukin tache ak N-tèminal nan proinsulin nan rezidi lizin. Pwoteyin lan te eksprime avèk efikasite epi lokalize nan kò enklizyon.

Apre izolasyon, pwoteyin lan te dijere pwoteyin lan pou pwodwi ensilin ak C-peptides. Yon lòt gwoup chèchè te aji menm jan an. Yon pwoteyin fizyon ki gen proinsulin ak de domèn sentetik nan staphylococcus Yon pwoteyin obligatwa IgG te lokalize nan kò enklizyon, men te gen yon nivo ki pi wo nan ekspresyon.

Pwoteyin la te izole pa IgG kwomatografi vokasyon ak dijere ak trypsin ak carboxypeptidase B. ensilin a ki kapab lakòz ak C-peptides yo te pirifye pa RP HPLC. Lè y ap kreye estrikti kole, rapò mas la nan pwoteyin konpayi asirans lan ak polipeptid la sib se trè siyifikatif.

Se konstriksyon an nan konstwi fizyon dekri kote se yon imen serom albumin obligatwa pwoteyin itilize kòm yon polipeptid konpayi asirans lan. Youn, twa ak sèt C-peptides te tache ak li.

C-peptides te konekte sou yon baz tèt-ke lè l sèvi avèk bag asid amine pote sit restriksyon Sfi I ak de rezin arginine nan kòmansman an ak nan fen distans la pou divizyon pwoteyin ki vin apre avèk trypsin. HPLC nan pwodwi yo klivaj te montre ke klivaj la nan C-peptides a se quantitative, ak sa a pèmèt itilize nan multimeric jèn sentetik jwenn polipeptid sib sou yon echèl endistriyèl.

Jwenn yon proinsulin mutan, ki genyen ranplasman nan Arg32Tyr. Lè yo te pwoteyin sa a ko-taye ak trypsin ak carboxypeptidase B, yo te natif natal ensilin ak yon C-peptide ki gen rezidi a tirozin ki te fòme. Lèt la, apre etikèt 125I, se aktivman yo itilize nan radioimmunoassay.

Ensilin ki fèt pou fabrike dwòg yo dwe gen pite segondè. Se poutèt sa, yon kontwòl trè efikas nan pite a nan pwodwi yo jwenn nan chak etap nan pwodiksyon ki nesesè. Précédemment, RP ak IO (echanj iyon) te itilize HPLC karakterize proinsulin-S-sulfonate, proinsulin, endividyèl A- ak B-chenn, ak S-sulfonates yo.

Yon atansyon patikilye yo peye tou nan derive nan ensilin fliyoresan. Nan travay la, otè yo envestige aplikabilite a ak enfatifikasyon nan metòd kwomatografik nan analiz la nan pwodwi nan tout etap nan pwodiksyon imen ensilin ak trase yon orè nan operasyon kromatografi efektivman separe ak karakterize pwodwi yo ki kapab lakòz.

Anplis de sa, apwòch yo ap devlope otomatize ak akselere pwosesis yo pou detèmine pite a ak kantite ensilin.

Yo te etidye sou posibilite pou yo itilize RP kromatografi likid ak deteksyon elèktrochimik detèmine ensilin, ak yon metodoloji pou detèmine ensilin izole nan ilon la Langerhans pa kwomatografi imunoafeite ak deteksyon spectrometric te devlope.

Nan travay la, yo te envestige posiblite pou lè l sèvi avèk mikrodeterminasyon rapid ensilin lè l sèvi avèk kapilè elektwoforèz ak lazè deteksyon fluoresans.Analiz la fèt pa ajoute nan echantiyon an yon kantite lajan li te ye nan ensilin ki make ak phenylisothiocyanate (FITC) ak yon fragman Fab nan monoclonal antikò ensilin. Etikèt regilye ak regilye konpetitif reyaji ak konplèks la Fab. Yo ensilin FITZ ki make ak konplèks li yo ak Fab separe nan 30 segonn.

Jenetik ensilin jeni

Kesyon an nan sa ki ensilin se te fè nan se nan enterè pa sèlman nan doktè yo ak famasyen yo, men tou pasyan ki gen dyabèt melitu, kòm byen ke fanmi yo ak zanmi yo.

Jodi a, sa a òmòn inik ak sa enpòtan pou sante moun ka jwenn nan divès kalite matyè premyè lè l sèvi avèk espesyalman devlope ak teknoloji ak anpil atansyon teste. Tou depan de metòd la nan preparasyon, kalite sa yo nan ensilin distenge:

• Kochon oswa bovin, ki rele tou pwodwi bèt
• Modifye kochon byosentetik modifye
• Jenetikman Enjenieri oswa recombinant
• Jenetikman modifye
• Sentetik

Te ensilin kochon te itilize pi long la pou dyabèt. Aplikasyon li te kòmanse tounen nan 20s yo nan dènye syèk lan.

Li ta dwe te note ke vyann kochon oswa bèt te dwòg la sèlman jouk 80s yo nan dènye syèk lan. Pou jwenn li, yo itilize tisi bèt pankreyas la.

Sepandan, metòd sa a ka diman dwe rele pi bon oswa senp: k ap travay ak biyolojik matyè premyè se pa toujou pratik, ak materyèl la anvan tout koreksyon tèt li se pa ase.

Anplis de sa, konpozisyon ensilin nan pork pa konplètman kowenside ak konpozisyon an nan òmòn nan ki te pwodwi pa yon moun ki an sante: divès kalite résidus asid amine yo prezan nan estrikti yo. Li ta dwe te note ke òmòn yo ki te pwodwi pa pankreyas la nan bèt gen yon menm menm pi gwo kantite diferans, ki pa ka rele yon fenomèn pozitif.

Nan yon preparasyon konsa, san konte sibstans multicomponent pi, proinsulin sa yo rele toujours sont, yon sibstans ki pa ka separe itilize metòd pou pirifye modèn. Li se li ki souvan vin tounen yon sous reyaksyon alèjik, ki se sitou danjere pou timoun yo ak granmoun aje la.

Famasi yon fwa ankò vle lajan kach an sou dyabetik. Gen yon sansib modèn dwòg Ewopeyen an, men yo kenbe trankil sou li. Sa.

Pou rezon sa a, syantis atravè mond lan te lontan yo te enterese nan pote konpozisyon an nan òmòn ki te pwodwi pa bèt nan plen konfòmite avèk òmòn yo pankreyas nan yon moun ki an sante. Yon zouti reyèl nan famasi ak tretman dyabèt te pwodiksyon yon dwòg semi-sentetik ke li te ranplase pa ranplase alanin nan asid amine nan yon preparasyon pou bèt ak threonine.

An menm tan an, yon metòd semi-sentetik pou pwodwi òmòn nan ki baze sou itilize nan preparasyon bèt. Nan lòt mo, yo tou senpleman sibi modifikasyon ak vin idantik ak òmòn pwodwi pa moun. Pami avantaj yo se konpatibilite ak kò imen an ak absans la nan reyaksyon alèjik.

Dezavantaj yo nan metòd sa a gen ladan yo akòz mank nan matyè premyè ak difikilte pou nan travay ak materyèl byolojik, osi byen ke gwo pwi de tou de teknoloji nan tèt li ak dwòg la ki kapab lakòz.

Nan sans sa a, medikaman ki pi bon pou tretman dyabèt se recombinant ensilin jwenn nan jeni jenetik.

By wout la, li se souvan yo rele jenetikman Enjenieri ensilin, konsa endike metòd la pou jwenn li, epi li se pwodwi a ki kapab lakòz yo rele moun ensilin, kidonk mete aksan sou idantite absoli li nan òmòn yo ki te pwodwi pa pankreyas la nan yon moun ki an sante.

Pami avantaj ki genyen nan jeni jenetik ensilin, youn ta dwe tou nòt segondè degre li yo nan pite ak mank de proinsulin, osi byen ke lefèt ke li pa lakòz okenn reyaksyon alèjik ak pa gen okenn kontr.

Kesyon yo poze souvan se konprann: ki sa egzakteman ensilin recombinant te fè nan? Li sanble ke se òmòn sa a ki te pwodwi pa tansyon ledven, osi byen ke Escherichia coli, yo mete l nan yon mwayen espesyal eleman nitritif. Anplis, kantite lajan an nan sibstans nan jwenn se konsa gwo ke li posib konplètman abandone itilize nan dwòg jwenn nan ògàn bèt.

Natirèlman, sa a se pa sou senp E. coli, men sou jèn ki modifye ak kapab pwodwi soluble imen jenetikman Enjenieri ensilin, konpozisyon an ak pwopriyete yo ki se egzakteman menm jan ak òmòn lan ki te pwodwi pa selil yo nan pankreyas la nan yon moun ki an sante.

Avantaj ki genyen nan jeni jenetik ensilin se pa sèlman absoli resanblans li nan òmòn imen, men tou, fasilite nan preparasyon, yon kantite lajan ase nan matyè premyè ak pri abòdab.

Syantis atravè mond lan rele pwodiksyon an nan recombinant ensilin yon zouti reyèl nan tretman an nan dyabèt. Siyifikasyon sa a dekouvèt se konsa gwo ak enpòtan ke li difisil a ègzajere li.

Li nan senp ase sonje ke jodi a prèske 95% nan bezwen pou òmòn sa a te rankontre avèk èd nan ensilin jenetikman Enjenyè.

An menm tan an, dè milye de moun ki te deja gen yon alèji ak dwòg te resevwa yon chans pou yon lavi nòmal.

Mwen te gen dyabèt pou 31 ane. Li se kounye a an sante. Men, sa yo kapsil yo aksesib pou moun òdinè, yo pa vle vann famasi, li pa pwofitab pou yo.

Ki jan moun ki jeni ensilin travay

Nan tretman dyabèt mellitus tip 1, yo itilize de-faz ensilin jeni jenetik moun. Nan famasi, li vann nan fòm yon solisyon epi li gen mak "renmen an". Dezyèm kalite maladi a kapab trete avèk yon medikaman tou si medikaman ki preskri yo pa apwopriye pou yon dyabetik.

Se ensilin jenetikman Enjenyè tou itilize si yon moun gen yon koma dyabetik. Doktè yo souvan preskri piki nan fanm ansent dyagnostike ak dyabèt melitu lè sik-bese grenn ak yon rejim ka geri pa ede.

An jeneral, ensilin jenetikman Enjenyè oswa GMOs yo te itilize pandan akouchman, lè yo ap sibi operasyon, oswa si dyabetik la se blese grav. Medikaman an pèmèt ou san danje chanje nan itilize nan rapidman aji òmòn.

1. Anvan ou itilize ensilin jeni jenetik nan de bò, li nesesè pou fè yon tès epi chèche konnen si medikaman sa a apwopriye pou pasyan an. Si yon dyabetik revele ipoglisemi, itilizasyon medikaman an pa rekòmande.
2. Konplo a nan aksyon nan solisyon an se ke ensèkilik jenetikman Enjenieri reyaji ak selil yo, ki mennen nan fòmasyon nan konplèks. Lè selil yo antre nan konplèks sa yo, yo ankouraje epi yo kòmanse travay pi aktivman. Kòm yon rezilta, plis anzim yo pwodwi.
3. Nan pwosesis la, glikoz absòbe pi vit, idrat kabòn ki antre nan kò a ap aktivman trete. Se konsa, fwa a pwodui glikoz pi long, ak pwoteyin ka absòbe pi vit.

Prensip la nan aksyon nan dwòg la depann sou dòz la, kalite ensilin, chwa nan sit piki. Nenpòt pwosedi yo ta dwe fè sèlman apre yo fin akò avèk doktè a ale. Premye piki yo fèt anba sipèvizyon medikal.

Rekòmandasyon pou itilize dwòg la

Menm jan oswa ensilin bifzazik imen jenetik jenetik gen non komès diferan. Epitou, òmòn ka varye nan dire nan aksyon, metòd la nan preparasyon nan solisyon an. Pwodwi yo rele ki baze sou ki kalite ensilin.

Ensilin jenetikman ensilin se yon pati nan medikaman tankou Humudar, Vozulim, Actrapid. Anpil moun, Gensulin. Sa a se pa yon lis konplè sou dwòg sa yo, nimewo yo se byen gwo.

Tout medikaman ki anwo yo varye an kontak ak kò a.GMO yo ka dire plizyè èdtan oswa yo dwe aktif pou jou antye.

Medikaman konbine de faz gen ladan dwòg ki gen ladan sèten eleman ki chanje peryòd ekspoze a dwòg la.

• Medikaman sa yo yo vann nan fòm lan nan melanj, ki gen ladan òmòn jwenn jenetikman.
• Lajan sa yo gen ladan Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin.
• Dwòg yo itilize de fwa nan yon jounen, mwatye yon èdtan anvan yon repa. Yo ta dwe tankou yon sistèm dwe entèdi respekte a, depi òmòn nan se dirèkteman gen rapò ak peryòd la nan konsomasyon manje.

Pa pwodiksyon jèn ensilin imen an, yo jwenn yon preparasyon ki gen yon tan ekspoze mwayèn.

1. Solisyon an pran efè nan 60 minit, men se moman sa a nan aktivite ki pi wo yo obsève sis a sèt èdtan apre piki a.
2. Medikaman an konplètman retire nan kò a apre 12 èdtan.
3. Medikaman sa yo enkli Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin.

Genyen tou GMOs ki gen yon peryòd kout ekspoze a kò an. Men sa yo enkli medikaman ensilin Actrapid, Gansulin, Humulin, Asistan, Rinsulin, Bioinsulin. Sa yo ensilin gen yon faz aktif apre de a twa èdtan, ak premye siy ki montre yo nan aksyon an nan dwòg la ka wè nan yon demi èdtan apre piki a.

Anvan yo administre ensilin lan, GMO yo bezwen egzamine pou transparans ak absans sibstans etranje nan likid la. Si sibstans etranje yo, turbidite oswa presipitasyon parèt nan medikaman an, yo dwe flak la abandone - medikaman an se pa apwopriye pou itilize.

Ensilin lan itilize yo dwe nan tanperati chanm. Dòz la nan òmòn la dwe ajiste si dyabetik la gen yon maladi enfektye, malfonksyònman tiwoyid, maladi Addison a, ipopituitarism, ak maladi kwonik nan ren.

Atak nan ipoglisemi yo posib ak yon surdozaj nan dwòg la, nan ka a nan yon tranzisyon nan yon nouvo kalite ensilin, akòz sote manje oswa overstrain fizik. Epitou fòt la kapab maladi ki diminye bezwen an pou yon òmòn - yon degre grav nan maladi ren, maladi fwa, diminye glann tiwoyid, adrenèl cortical, ak glann pitwitèr.

1. Yon diminisyon byen file nan sik nan san se posib ak yon chanjman nan zòn nan piki. Se poutèt sa, li nesesè pou chanje soti nan yon kalite ensilin rezonab epi sèlman apre yon akò avèk doktè a ale.
2. Si yon dyabetik itilize ensilin kout-aji, pafwa volim nan tisi gra diminye nan sit piki a oswa, Kontrèman, ogmante. Pou anpeche sa a, piki a dwe fèt nan diferan kote.

Fanm ansent yo dwe konnen ke kondisyon ensilin ka varye pandan trimès diferan nan gwosès la. Pou fè sa, ou bezwen fè yon tès chak jou sik nan san ak yon glucometer.

Se aksyon an nan ensilin sou kò imen an dekri an detay nan videyo a nan atik sa a.

1. Estrikti a ak fonksyon ensilin 5

1.1. Estrikti molekil ensilin 5

1.2. Siyifikasyon byolojik ensilin 7

1.3. Ensilin Biosynthesis 8

2. Jenetik jenetik sentèz ensilin 10

2.1. Itilizasyon metòd jeni jenetik pou sentèz dwòg 10

2.2. Metòd jeni jenetik 11

2.3. Pwodiksyon jeni jenetik ensilin 14

Konklizyon 18

Sentòm surdozaj

Lè w ap itilize ensilin, li enpòtan yo swiv rekòmandasyon doktè a epi obsève dòz egzak la nan dwòg la preskri.

Nan ka ki pa konfòme avèk règleman yo ak yon surdozaj, dyabetik la kòmanse gen maltèt grav, kranp, grangou, swe, batman kè, moun nan vin travay twòp travay, irite. Frison nan tout kò a ak tranbleman tou kapab obsève.

Sentòm sa yo sanble anpil ak siy yon diminisyon nan glikoz nan san.Avèk yon etap modere nan sentòm yo, dyabetik la ka poukont rezoud pwoblèm nan ak amelyore kondisyon an. Pou fè sa, manje sirèt oswa nenpòt lòt pwodwi dous ki gen sik.

• Si yon koma dyabetik rive, yo itilize yon solisyon dextrose, se dwòg la administre venn pase jouk jou moun nan se konsyan. Nan premye siy yo sispèk, li nesesè yo rele yon anbilans, ki pral kapab pote pasyan an nan lavi pa metòd ijans.
• Kòm efè segondè apre yo fin itilize nan GMOs, yon moun gen gratèl sou po a nan fòm lan nan urtikèr, pati nan kò a anfle, san presyon gout sevè, gratèl ak souf kout ka rive. Sa a se yon reyaksyon alèjik nan yon dwòg, ki apre yon ti tan ka disparèt sou pwòp li yo san yo pa entèvansyon medikal. Si sitiyasyon an kontinye, ou ta dwe konsilte doktè ou.
• Nan premye jou yo nan pran yon preparasyon ensilin, dyabetik souvan dezidrate kò a, yon moun eksperyans yon mank de likid, apeti vin pi grav, anfle sou bra yo ak janm parèt, epi li se somnolans konstan. Sentòm sa yo anjeneral ale byen vit epi yo pa rive ankò.

Revi ak kòmantè

Mwen gen dyabèt tip 2 - ki pa ensilin depann. Yon zanmi konseye bese sik nan san ak DiabeNot. Mwen te bay lòd sou Entènèt la. Te kòmanse resepsyon an.

Mwen swiv yon rejim alimantè ki pa strik, chak maten mwen te kòmanse mache 2-3 kilomèt sou pye. Plis pase de semèn ki sot pase yo, mwen remake yon diminisyon lis nan sik sou kontè an nan maten an anvan manje maten soti nan 9.3 7.1, e menm a 6 yè.

1! Mwen kontinye kou prevansyon an. Mwen pral koupe abònman sou siksè.

Margarita Pavlovna, mwen menm tou chita sou Diabenot kounye a. SD 2. Mwen reyèlman pa gen tan pou yon rejim alimantè ak mache, men mwen pa abize bagay dous ak idrat kabòn, mwen panse ke XE, men akòz laj, sik se toujou wo.

Rezilta yo pa osi bon ke ou, men pou 7.0 sik pa soti pou yon semèn. Ki sa ki glucometer ou mezire sik ak? Èske li montre ou plasma oswa san konplè? Mwen vle konpare rezilta yo nan pran medikaman an.

Mèsi anpil pou yon pòs konsa enfòmatif.

Pwodiksyon jeni jenetik ensilin

Pou fè yon moun santi li an sante, ou bezwen kontwole nivo ensilin nan kò a. Shouldmòn sa a ta dwe ase pou ke glikoz pa akimile nan san an. Sinon, nan ka ta gen maladi metabolik, doktè a dyagnostik dyabèt.

Terapi pou etap avanse nan dyabèt melitu se ranplir konsantrasyon ki manke nan ensilin, ki pa ka pwodwi natirèlman pa kò a. Pou sa, se soluble ensilin itilize, ki se menm jan ak moun jenetikman Enjenieri. Pankreya yo responsab pou pwodiksyon yon òmòn konsa.

Pou pwodiksyon ensilin, se pa sèlman teknoloji pou pwodwi òmòn natirèl yo itilize, manifaktirè yo tou itilize atifisyèlman jwenn modifye ensilin. Se dwòg la ki make "solubilis" endike kòm soluble.

Kalite dwòg

Menm jan oswa ensilin bifzazik imen jenetik jenetik gen non komès diferan. Epitou, òmòn ka varye nan dire nan aksyon, metòd la nan preparasyon nan solisyon an. Pwodwi yo rele ki baze sou ki kalite ensilin.

Ensilin jenetikman ensilin se yon pati nan medikaman tankou Humudar, Vozulim, Actrapid. Anpil moun, Gensulin. Sa a se pa yon lis konplè sou dwòg sa yo, nimewo yo se byen gwo.

Tout medikaman ki anwo yo varye an kontak ak kò a. GMO yo ka dire plizyè èdtan oswa yo dwe aktif pou jou antye.

Medikaman konbine de faz gen ladan dwòg ki gen ladan sèten eleman ki chanje peryòd ekspoze a dwòg la.

• Medikaman sa yo yo vann nan fòm lan nan melanj, ki gen ladan òmòn jwenn jenetikman.
• Lajan sa yo gen ladan Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin.
• Dwòg yo itilize de fwa nan yon jounen, mwatye yon èdtan anvan yon repa. Yo ta dwe tankou yon sistèm dwe entèdi respekte a, depi òmòn nan se dirèkteman gen rapò ak peryòd la nan konsomasyon manje.

Pa pwodiksyon jèn ensilin imen an, yo jwenn yon preparasyon ki gen yon tan ekspoze mwayèn.

1. Solisyon an pran efè nan 60 minit, men se moman sa a nan aktivite ki pi wo yo obsève sis a sèt èdtan apre piki a.
2. Medikaman an konplètman retire nan kò a apre 12 èdtan.
3. Medikaman sa yo enkli Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin.

Genyen tou GMOs ki gen yon peryòd kout ekspoze a kò an. Men sa yo enkli medikaman ensilin Actrapid, Gansulin, Humulin, Asistan, Rinsulin, Bioinsulin. Sa yo ensilin gen yon faz aktif apre de a twa èdtan, ak premye siy ki montre yo nan aksyon an nan dwòg la ka wè nan yon demi èdtan apre piki a.

Medikaman sa yo konplètman elimine nan kò a apre sis èdtan.

Sèvi ak ensilin soluble moun jenetikman Enjenieri pou dyabèt

Imen ensilin jenetikman enjenyè se yon ranplasman òmòn komen pou ensilin ki pwodui pankreyas la.

Se pa sèlman jenetikman modifye òmòn imen itilize pou sentèz, men tou sentetik kreye sibstans ki sou. Yon lòt byen li te ye opsyon pou kreye dwòg la se itilize nan modifye ensilin kochon, paske

nan konpozisyon li yo ak fonksyon, li se pi pre imen an.

Jeni jenetik pwodiksyon ensilin orè.

Endikasyon ak kontr

Ka ensilin jenetikman Enjenieri dwe itilize tou de dyabèt tip 1 mellitus ak kalite 2 dyabèt, lè yon reyaksyon fiks a dwòg oral ak yon nati ipoglisemi se obsève.

Li kapab itilize lè pasyan an se nan sèten kalite koma. Si yon fanm ansent fèk kòmanse ap fè dyabèt, lè sa a se itilizasyon ensilin jeni, men se sèlman si rejim alimantè a pa afekte nivo glikoz. Itilizasyon li rekòmande nan ka enfeksyon ak enfeksyon nan ki ka hyperthermia obsève.

Preparasyon pou jèn yo gen siksè nan itilizasyon yo pandan akouchman, operasyon, blesi, pwoblèm metabolik yo ak nan ka yon tranzisyon gradyèl nan ensilin ak yon aksyon long.

Li entèdi pou itilize preparasyon jèn pou ranplase òmòn yo ak ipersansibilite a sèten eleman nan dwòg la ak ipoglisemi.

Aksyon farmakolojik dwòg

Dwòg nan kalite sa a reyaji ak sèten reseptè miray selil, fòme konplèks ak yo. Lè li antre nan selil yo, konplèks la nan dwòg la afekte travay la, enteresan li yo dwe pi aktif ak pwodwi anzim adisyonèl.

Nivo glikoz la tonbe akòz lefèt ke selil yo trete li pi vit. Apre sa, se pwosesis la nan lipojenèz, pwodiksyon pwoteyin akselere ak vitès la nan fwa a nan fòmasyon an nan glikoz redwi.

Dire a nan dwòg la pral depann sou sit la piki, kalite dwòg, dòz ak repons endividyèl nan kò imen an. Se sèlman yon doktè ka mete dòz ak preskri medikaman sèten nan gwoup sa a. Nan peryòd inisyal la nan pran dwòg, se pasyan an kontwole seryezman pa doktè yo chèche konnen si yo pran medikaman an rejte.

Men kèk egzanp Medsin ensilin imenetik jenetik

Imen ensilin jenetikman Enjenyè genyen nan yo nan dwòg ki byen koni kòm Insuran, Insuman, Vozulim, Penfill, Biosulin, Gensulin, Actrapid, Rinsulin, Humulin, Humudar, Rosinsulin ak kèk lòt moun.

Gen divès kalite ensilin.Youn nan klasifikasyon yo gen rapò ak dire a nan dwòg la. Dapre li, ensilin soluble ka gen yon aksyon kout ak long. Gen dwòg konbine (ensilin bififye), ki gen yon sibstans ki sou tou de rapid ak pwolonje aksyon.

Kalite medikaman sa a rele yon melanj. Pami yo, gen moun ki te kreye ak yon chanjman nan òmòn imen an. De-faz ensilin se Mikstard, Gansulin, Insuman, Humulin ak Gensulin. Yo bezwen itilize de fwa nan yon jounen, mwatye yon èdtan anvan yo manje.

Sa a se akòz lefèt ke de-faz ensilin gen yon sibstans ki kout-aji, konsomasyon nan ki depann sou rejim alimantè a.

Yon analogik jeni nan òmòn imen se nan mitan dwòg ak yon degre mwayèn nan dire. Ensilin soluble sa a kòmanse aji apre yon èdtan, ak pik nan aktivite li yo fèt apre 7 èdtan. Apre 12 èdtan, li parèt. Imèn jenetikman dwòg gwoup sa a se Insuman, Protafan, Humulin, Rinsulin, Biosulin, Gensulin, Gansulin, Insuran.

Gen yon dwòg imen jenetikman pami gwoup la ak yon aksyon kout. Pa egzanp, sa enkli Gansulin, Insuran, Humulin, Rinsulin, Gensulin, Bioinsulin ak Actrapid. Ensilin sa a ka inibit nan mwatye èdtan, epi aktivite li rive nan nivo maksimòm li nan yon koup de èdtan. Medikaman sa yo elimine pou 6 èdtan.

Nan ka yon surdozaj nan dwòg ak jenetikman Enjenyè ensilin, feblès, somnolans, fatig, chimerik, frison, ogmante eskresyon nan swe frèt, tranble kou fèy bwa, palpitasyon, maltèt, kranp ak grangou ka rive. Tout moun sa yo se sentòm ipoglisemi.

Si maladi sa a jis kòmanse devlope epi li se nan premye etap pi bonè li yo, Lè sa a, ou ka retire tout sentòm yo tèt ou. Pou fè sa, ou bezwen manje manje ki gen sik ak wo nan idrat kabòn, ki ka fasil dijere. Ka solisyon glucagon ak dextrose ka prezante nan kò a.

Si yon moun tonbe nan koma, lè sa a ou bezwen enjekte yon solisyon dextrose modifye jiskaske sitiyasyon an amelyore.

Gen kèk moun ki ka devlope reyaksyon alèji ak itilizasyon jenetikman modifye medikaman ak ensilin. Sentòm yo ka gen ladan itikè, anfle, pèt fòs, tansyon ba, souf kout, gratèl, lafyèv, ak gratèl.

Nan kèk ka, ipoglisemi ak koma rive. Pwoblèm ak konsyans moun ak menm koma ka rive. Si yon pasyan rate medikaman, lè sa a li ka devlope ipèglisemi.

Li parèt akòz preliminè dòz ki ba, ak devlopman nan fenomèn ki gen enfeksyon nan kò a, epi tou si ou pa konfòme yo ak règleman yo nan rejim alimantè a.

Nan kèk ka, pasyan an ka devlope lipodistrofi nan kote yo bay medikaman an.

Nan kòmansman an nan itilize nan dwòg la, gonfleman, mank de dlo, somnolans, ak apeti ka deteryore. Men fenomèn sa yo tanporè.

Itilize yon ranplasan pou ensilin natirèl, tankou yon sibstans jenetikman enjenyè, se yon adisyon ekselan nan tretman an nan dyabèt.

Li ede diminye nivo sik la akòz lefèt ke selil yo absòbe glikoz, epi pwosesis transpò li chanje. Men medikaman sa yo dwe itilize entèdi selon preskripsyon doktè a, paske

yo kapab lakòz efè sou sante pou pasyan an.

Ki sa ki ensilin te fè soti nan?

Ensilin se medikaman prensipal la pou tretman dyabèt tip 1. Pafwa li se tou itilize estabilize pasyan an ak amelyore byennèt li nan dezyèm kalite a nan maladi. Sa a sibstans ki sou nati li yo se yon òmòn ki kapab afekte metabolis idrat kabòn nan dòz piti.

Nòmalman, pankreyas la pwodui ase ensilin, ki ede kenbe nivo fizyolojik sik nan san. Men, ak maladi grav andokrinyen, sèl chans pou ede pasyan an souvan se piki ensilin.

Malerezman, li enposib pou pran li oralman (nan fòm tablèt), depi li detwi nèt nan aparèy dijestif la epi li pèdi valè byolojik li.

Preparasyon jwenn nan matyè premyè ki gen orijin bèt

Jwenn òmòn sa a soti nan pankreyas la nan kochon ak bèt se yon teknoloji fin vye granmoun ki se raman itilize jodi an.

Sa a se akòz bon jan kalite a ki ba nan medikaman an te resevwa, tandans li yo lakòz reyaksyon alèjik ak yon degre ase nan pou pirifye.

Reyalite a se ke depi òmòn lan se yon sibstans ki sou pwoteyin, li konsiste de yon seri espesifik nan asid amine.

Ensilin lan ki te pwodwi nan kò kochon an diferan nan konpozisyon asid amine soti nan ensilin imen pa 1 asid amine, ak ensilin bovin pa 3.

Nan kòmansman ak nan mitan 20yèm syèk la, lè dwòg ki sanble pa te egziste, menm tankou ensilin te yon zouti nan medikaman ak pèmèt pran tretman an dyabetik nan yon nivo nouvo. Onesmòn ki te jwenn nan metòd sa a redwi sik nan san, sepandan, yo souvan ki te koze efè segondè ak alèji.

Diferans nan konpozisyon sa a nan asid amine ak enpurte nan dwòg la afekte kondisyon an nan pasyan yo, espesyalman nan kategori ki plis vilnerab nan pasyan (timoun yo ak granmoun aje la).

Yon lòt rezon pou tolerans pòv nan ensilin sa yo se prezans nan inaktif li yo nan dwòg la (proinsulin), ki te enposib debarase m de nan sa a varyasyon dwòg.

Sèjousi, gen ensilin vyann kochon avanse ki manke nan enpèfeksyon sa yo. Yo jwenn nan pankreyas la nan yon kochon, men apre yo ke yo ap sibi pwosesis adisyonèl ak pou pirifye. Yo multikomponent epi yo genyen èksipyan.

Modifye ensilin kochon se pratikman pa diferan de òmòn imen an, kidonk li se toujou itilize nan pratik

Medikaman sa yo tolere pa pasyan yo pi bon ak pratikman pa lakòz reyaksyon negatif yo, yo pa anpeche sistèm iminitè a ak efektivman redwi sik nan san. Ensilin bovin pa itilize nan medikaman jodi a, paske akòz estrikti etranje li yo afekte sistèm iminitè yo ak lòt sistèm kò imen an.

Jenetik Jeni ensilin

Imèn ensilin, ki itilize pou dyabetik, sou yon echèl endistriyèl yo jwenn nan de fason:

Kondisyon depo pou ensilin

• lè l sèvi avèk tretman anzimatik nan ensilin nan pork,
• lè l sèvi avèk tansyon jenetikman modifye nan Escherichia coli oswa ledven.

Avèk yon chanjman fizik-chimik, molekil yo nan ensilin nan pork ki anba aksyon an nan anzim espesyal vin idantik ak ensilin moun. Konpozisyon nan asid amine nan preparasyon an ki kapab lakòz se pa diferan de konpozisyon an nan òmòn natirèl la ki se pwodwi nan kò imen an.

Nan pwosesis manifakti a, medikaman an sibi gwo pirifye, kidonk li pa lakòz reyaksyon alèjik oswa lòt manifestasyon endezirab.

Men, pi souvan, ensilin jwenn lè l sèvi avèk modifye (jenetikman modifye) mikwo-òganis. Sèvi ak metòd bioteknolojik, bakteri oswa ledven yo modifye nan yon fason ke yo menm yo ka pwodwi ensilin.

Anplis de pwodiksyon ensilin li menm, pirifye li yo jwe yon wòl enpòtan. Se konsa, ki dwòg la pa lakòz okenn reyaksyon alèjik ak enflamatwa, nan chak etap li nesesè pou kontwole pite a nan tansyon yo nan mikwo-òganis ak tout solisyon, osi byen ke engredyan yo itilize yo.

Gen 2 metòd pou pwodiksyon ensilin konsa. Premye a nan yo ki baze sou itilize nan de tansyon diferan (espès) nan yon sèl mikwo-òganis.

Chak nan yo sentetiz sèlman yon sèl chèn nan molekil la ADN òmòn (gen sèlman de nan yo, epi yo ap espiral trese ansanm).

Lè sa a, sa yo chenn yo konekte, ak nan solisyon an ki kapab lakòz li se deja posib yo separe fòm yo aktif nan ensilin nan men moun ki pa pote nenpòt ki siyifikasyon byolojik.

Se dezyèm fason a jwenn medikaman an lè l sèvi avèk Escherichia coli ledven ki baze sou lefèt ke mikròb la premye pwodui inaktif ensilin (ki se, predesesè li yo, proinsulin). Lè sa a, lè l sèvi avèk tretman anzimatik, se fòm sa a aktive ak itilize nan medikaman.

Pèsonèl ki gen aksè a enstalasyon pwodiksyon sèten yo ta dwe toujou abiye nan yon kostim pwoteksyon esteril, ki elimine kontak la nan dwòg la ak likid imen byolojik.

Tout pwosesis sa yo anjeneral otomatik, lè ak tout sifas ki an kontak ak anpoul yo ak flacons yo esteril, ak liy ak ekipman yo se fèrme hermeticement.

Metòd biyoteknoloji pèmèt syantis yo panse osijè de solisyon altènatif a dyabèt.

Pou egzanp, pou dat, etid pre-klinik nan pwodiksyon an nan atifisyèl selil beta pankreyas yo ap fèt, ki ka jwenn lè l sèvi avèk metòd jeni jenetik.

Petèt nan lavni yo pral itilize yo amelyore fonksyone nan ògàn sa a nan yon moun ki malad.

Pwodiksyon modèn preparasyon ensilin yo se yon pwosesis teknolojik konplèks ki enplike automatisation ak minimòm entèvansyon imen

Lòt konpozan

Pwodiksyon ensilin san eksipyan nan mond modèn lan prèske enposib pou imajine, paske yo ka amelyore pwopriyete chimik li yo, pwolonje tan aksyon an epi reyalize yon wo degre pite.

Pa pwopriyete yo, tout engredyan adisyonèl ka divize an klas sa yo:

• prolongateur (sibstans ki itilize pou bay yon dire pi long nan aksyon nan dwòg la),
• dezenfektan konpozan
• estabilize, akòz ki se pi bon asidite konsève nan solisyon an dwòg.

Pwolonje Aditif

Gen ensilin ki mache long ki gen byolojik ki dire 8 a 42 èdtan (depann de gwoup medikaman an). Sa a se efè reyalize akòz adisyon a nan sibstans ki sou espesyal - prolongateur solisyon an piki. Pi souvan, youn nan konpoze sa yo yo itilize pou objektif sa a:

Pwoteyin ki pwolonje aksyon an nan dwòg la sibi detay pou pirifye epi yo ba-alèjenik (pou egzanp, protamin). Sèl Zenk tou pa yon move efè sou aktivite ensilin oswa byennèt moun.

Dezenfektan ki nan konpozisyon ensilin la nesesè pou flè mikwòb la pa miltipliye pandan depo epi itilize li. Sibstans sa yo se préservatifs ak asire prezèvasyon nan aktivite a byolojik nan dwòg la.

Anplis de sa, si pasyan an administre òmòn ki soti nan yon ti poban sèlman nan tèt li, Lè sa a, medikaman an ka dire pou plizyè jou.

Akòz bon jan kalite eleman anti-bakteri, li pa pral bezwen an jete yon dwòg rès akòz posibilite teyorik nan repwodiksyon nan yon solisyon nan mikwòb.

Ou ka itilize sibstans sa yo kòm dezenfektan nan pwodiksyon ensilin:

Si solisyon an gen iyon zenk, yo tou aji kòm yon konsèvasyon adisyonèl akòz pwopriyete antibiotics yo

Kèk eleman dezenfektan yo apwopriye pou pwodiksyon chak ensilin. Dwe entèraksyon yo ak òmòn la dwe envestige nan etap nan esè pre-klinik, depi konsèvasyon a pa dwe deranje aktivite a byolojik nan ensilin oswa otreman afekte pwopriyete li yo.

Itilize nan préservatifs nan pifò ka pèmèt òmòn la yo dwe bay anba po a san yo pa tretman anvan ak alkòl oswa antiseptik lòt (manifakti a anjeneral refere a sa a nan enstriksyon yo).

Sa a senplifye administrasyon dwòg la epi redui kantite manipilasyon preparatwa anvan piki nan tèt li.

Men rekòmandasyon sa a sèlman travay si se solisyon an administre lè l sèvi avèk yon sereng ensilin endividyèl ak yon zegwi mens.

Estabilizasyon

Estabilizan yo nesesè pou pH la nan solisyon an konsève nan yon nivo bay yo. Prezèvasyon dwòg la, aktivite li yo ak estabilite a nan pwopriyete chimik depann sou nivo asidite. Nan envantè nan òmòn piki pou pasyan ki gen dyabèt, fosfat yo anjeneral yo itilize pou objektif sa a.

Pou ensilin ak zenk, estabilize solisyon yo pa toujou nesesè, depi iyon metal yo ede kenbe balans ki nesesè yo.

Si yo kanmenm itilize, Lè sa a, lòt konpoze chimik yo te itilize olye pou yo fosfat, depi yon konbinezon de sibstans sa yo mennen nan presipitasyon ak apwopriye nan dwòg la.

Yon pwopriyete enpòtan yo montre nan tout estabilize se sekirite ak enkapasite a antre nan nenpòt ki reyaksyon ak ensilin.

Yon endocrinolog konpetan ta dwe fè fas ak seleksyon an nan dwòg injectable pou dyabèt pou chak pasyan endividyèlman.

Travay la nan ensilin se pa sèlman yo kenbe yon nivo nòmal nan sik nan san an, men tou, pa mal lòt ògàn ak sistèm. Medikaman an ta dwe chimikman net, ba alèjenik ak de preferans abòdab.

Li se tou byen bon si ensilin la chwazi ka melanje ak lòt vèsyon li yo selon dire a nan aksyon.

Jwenn ensilin, metòd jeni jenetik, biyoteknoloji - Kou

1. Estrikti a ak fonksyon ensilin 5

1.1. Estrikti molekil ensilin 5

1.2. Siyifikasyon byolojik ensilin 7

1.3. Ensilin Biosynthesis 8

2. Jenetik jenetik sentèz ensilin 10

2.1. Itilizasyon metòd jeni jenetik pou sentèz dwòg 10

2.2. Metòd jeni jenetik 11

2.3. Pwodiksyon jeni jenetik ensilin 14